無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶試劑

無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶試劑是一種核酸內(nèi)切酶，可將核酸降解成2~5個(gè)堿基的5‘單磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（雙鏈，

單鏈，線狀，環(huán)狀）的DNA和RNA而沒有蛋白裂解活性，又被稱為“全能核酸酶"。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白樣品

粘度，去除蛋白樣品中核酸的污染，且無蛋白酶活性殘留，核酸酶活性達(dá)1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的

同時(shí)， 也具有多種其他用途，如：減少了樣品處理時(shí)間，增加了蛋白產(chǎn)量，離心時(shí)時(shí)沉淀和上清分離的更好，

更便于溶液的離心（尤其是超濾）；提高色譜純化的效率等。

本公司Benzonase核酸酶包括四種，分別為不含任何標(biāo)簽的Benzonase核酸酶（科研級(jí)別）、無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶、

Strep tagII Benzonase核酸酶（科研級(jí)別）和無內(nèi)毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶，可適應(yīng)不同下游用途的需求。

其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通過Strep Tactin XT Resin高效去除，而無內(nèi)毒素的兩種Benzonase

核酸酶，內(nèi)毒素含量<40EU/mL（按照單位換算量計(jì)算為，每1000U中含有的內(nèi)毒素<0.15EU），可適用于藥用級(jí)別的研發(fā)和

生產(chǎn)。另外，核酸酶殘留可通過我公司開發(fā)的基于 熒光探針的Benzonase核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒進(jìn)行評(píng)測(cè)，15min即可完成

檢測(cè)，低可檢測(cè)到2ng/ml的核酸酶殘留。

用量推薦

實(shí)驗(yàn)類型電泳蛋白樣品制備非藥物蛋白生產(chǎn)藥物蛋白生產(chǎn)疫苗、病毒生產(chǎn)細(xì)胞藥物

推薦產(chǎn)品Benzonase(科研級(jí))Benzonase(科研級(jí))

Strep-tagII Benzonase(科研級(jí))Benzonase(無內(nèi)毒素級(jí))

Strep-tagII Benzonase(無內(nèi)毒素級(jí))

細(xì)胞數(shù)量1X106個(gè)細(xì)胞(10mg組織)1g濕重 （重懸液10mL）1L 發(fā)酵上清液1L 培養(yǎng)物

用量125U (0.5 µL)25U/mL(1 µL)25U/mL(1 µL)0.1U/mL(0.4 µL)0.1U/mL(0.4 µL)

推薦用量500U (2 µL)250U/mL(10 µL)250U/mL(10 µL)25U/mL(100 µL)5U/mL(20 µL)

作用時(shí)間通常作用時(shí)間37℃在15~60min；25℃在30~120min；

單位定義

37℃，pH 8.0反應(yīng)條件下，在30分鐘內(nèi)使△A260 值降低1.0(相當(dāng)于消化37 μg DNA )的酶量定義為一個(gè)活性單位。

注意：含大量蛋白、細(xì)胞壁、其它鹽分的粗制品，對(duì)該酶活性有部分抑制作用，使用時(shí)需要增加酶的用量。

應(yīng)用

蛋白提取時(shí)去除核酸污染：在重組蛋白純化或組織細(xì)胞樣品蛋白提取時(shí)，Benzonase核酸酶可有效降低樣品粘度，利于下游操作

與細(xì)胞或細(xì)菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白質(zhì)產(chǎn)量

減少存放的外周血單細(xì)胞(PBMC)的結(jié)塊現(xiàn)象

降解核酸，利于不可溶性蛋白復(fù)性前高質(zhì)量包涵體制備

有效去除帶負(fù)電荷的核酸對(duì)雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響，改善蛋白質(zhì)的分離效果，增強(qiáng)2-DE分辨率

疫苗和病毒樣品制備中DNA污染的去除

儲(chǔ)存

置于-20°C，可保存2年。

無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶試劑溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果，可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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