Thermostable RnaseH試劑

Thermostable  RnaseH試劑來源于極度耐熱菌Thermus thermophilus.，可在較高溫度下特異性地降解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵，而DNA鏈保持完整，故能降解RNA/DNA雜交鏈中的RNA鏈。與E.coli Rnase H相比， 該熱穩定Rnase H在25-65°C均具有活性，并且該酶在95°C加熱10min后仍保留全部活性。

由于具有高的熱穩定性，對于需要高溫反應條件的分子生物學應用，熱穩定Rnase H是一個理想的選擇。本制品是經大腸桿菌重組表達純化而得。

單位定義

一單位指50 μl反應體系中，50℃條件下，20min內從40bp的 RNA-DNA雜交鏈中水解出1nmol核糖核酸底物所需的酶量。

儲存

置于-20°C，可保存3年。

Thermostable  RnaseH試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應用實例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果，可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。

應用實例2： 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略，在反應結束后，倒置反應管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現出醒目的綠色，陰性表現出橙色，區分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。

應用實例3：A3825-01 紅黃變色反應（肉眼觀察）

以 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起

始前，下圖為 65 度反應 30min 后。

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