原代肝細胞極為嬌貴，其凍存復蘇后的活性與功能高度依賴于冷凍過程。一個科學、溫和的梯度降溫方案是確保細胞在經(jīng)歷-196℃深低溫后仍能“復活”的關鍵。該方案的核心在于控制冰晶形成、減少滲透壓損傷，并最大限度地保護細胞膜和線粒體功能。核心原則：規(guī)...

小鼠胚胎成纖維細胞（MEF）原代培養(yǎng)在生命科學研究中用途廣泛，主要包括以下幾個方向：細胞保種與細胞庫建立原代MEF可作為細胞保種體系，用于長期保存細胞株并在需要時復蘇，保證實驗材料的穩(wěn)定性和可重復性。胚胎干細胞（ES）/誘導多能干細胞（iP...

實驗材料新鮮組織試劑、試劑盒二甲苯酒精H2O2抗原修復液枸櫞酸鈉緩沖液石蠟福爾馬林PBSDAB蘇木素樹膠丙酮打孔液檸檬酸鈉APES儀器、耗材恒溫搖床高壓鍋塑料切片架耐溫玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰凍切片機載玻片實驗步驟一．石蠟切片免疫組化染色...

PCR產(chǎn)物的電泳檢測時間一般為48h以內(nèi)，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規(guī)則甚致消失。假陰性，不出現(xiàn)擴增條帶PCR反應的關鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備，②引物的質(zhì)量與特異性，③酶的質(zhì)量及，④PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應針對上述環(huán)節(jié)進...

一、質(zhì)粒干粉（負20度保存，保質(zhì)期90天，常溫運輸）1、收到干粉質(zhì)粒后請先5000rpm離心1min,再加入20μl無菌水溶解質(zhì)粒；2、將相應的感受態(tài)于冰盒上解凍，取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min；3、42度熱激60s，冰...

HOEC人口腔上皮細胞系是一種從人口腔組織中分離并培養(yǎng)得到的細胞系，具有特定的生物學特性和應用價值。以下將從多個角度對HOEC人口腔上皮細胞系進行詳細介紹。一、HOEC人口腔上皮細胞系的來源與特性HOEC人口腔上皮細胞系來源于人體口腔組織，...

RFP，全稱為RedFluorescentProtein，即紅色熒光蛋白，是一種在生物醫(yī)學研究和生物技術領域中廣泛應用的標記工具。紅色熒光蛋白最初是從珊瑚中分離出來的一種天然熒光蛋白，具有在特定波長光激發(fā)下發(fā)出紅色熒光的特性。技術原理紅色熒...

一、細胞復蘇：喚醒沉睡的“種子”剛從ATCC獲取的凍存細胞就像冬眠的種子，需要溫柔喚醒：快速解凍：37℃水浴中輕輕搖晃，1-2分鐘內(nèi)完成梯度稀釋：用預溫培養(yǎng)基按1:5緩慢稀釋，避免滲透壓沖擊離心去凍存液：1000rpm離心5分鐘，去除含DM...

在PCR實驗中，內(nèi)參基因（又稱管家基因）扮演著至關重要的角色，主要體現(xiàn)在以下三個方面：1.樣品質(zhì)量監(jiān)控：內(nèi)參基因作為實驗體系的陽性對照，其穩(wěn)定表達特性可驗證樣品處理流程的完整性。當使用同一模板進行PCR擴增時，若內(nèi)參基因的Ct值處于合理范圍...