T4噬菌體基因32編碼蛋白試劑

T4噬菌體基因32編碼蛋白試劑(T4 gene 32 protein, GP32 Protein)是一種單鏈 DNA（ssDNA）結合蛋白，為T4噬菌體DNA復制和修復所必需。它協(xié)調性地結合并穩(wěn)定瞬時形成的ssDNA區(qū)域，在T4 噬菌體DNA復制過程中起著重要的結構性作用。該蛋白也被廣泛地用于穩(wěn)定和標記ssDNA區(qū)域，以便用電子顯微鏡觀察細胞內DNA的結構。最新報道表明T4噬菌體基因32 編碼蛋白可以促進限制性內切酶的消化反應、RT-PCR 中反轉錄的效率、增強T4 DNA聚合酶的活性和提高PCR的產量。

應用

在 RT-PCR 過程中，增加反轉錄的產量和延伸能力

土壤樣品進行 PCR 時，增加目的片段的產量和特異性

穩(wěn)定和標記 ssDNA 結構

儲存

-20℃可保存3年。

使用注意事項

（1） 該蛋白分子量為33kD。

（2）該蛋白不含有甘油成分，可用于凍干體系建立。

（3）該蛋白的最佳反應溫度為37°C，65°C 20min可使該蛋白失活。

T4噬菌體基因32編碼蛋白試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應用實例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果，可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。

應用實例2： 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略，在反應結束后，倒置反應管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現出醒目的綠色，陰性表現出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。

應用實例3：A3825-01 紅黃變色反應（肉眼觀察）

以 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起

始前，下圖為 65 度反應 30min 后。

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