Benzonase 核酸酶試劑

Benzonase 核酸酶試劑，是一種核酸內切酶，可將核酸降解成2~5個堿基的5‘單磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式

（雙鏈，單鏈，線狀，環狀）的DNA和RNA而沒有蛋白裂解活性，又被稱為“全能核酸酶"。Benzonase核酸酶能有效降

低蛋白樣品粘度，去除蛋白樣品中核酸的污染，且無蛋白酶活性殘留，核酸酶活性達1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在

降低粘性的同時， 也具有多種其他用途，如：減少了樣品處理時間，增加了蛋白產量，離心時時沉淀和上清分離的更，

更便于溶液的離心（尤其是超濾）；提高色譜純化的效率等。

本公司Benzonase核酸酶包括四種，分別為不含任何標簽的Benzonase核酸酶（科研級別）、無內毒素Benzonase核酸酶、

Strep tagII Benzonase核酸酶（科研級別）和無內毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶，可適應不同下游用途的需求。

其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通過Strep Tactin XT Resin高效去除，

而無內毒素的兩種Benzonase核酸酶，內毒素含量<40EU/mL（按照單位換算量計算為，每1000U中含有的內毒素<0.15EU）

，可適用于藥用級別的研發和生產。另外，核酸酶殘留可通過我公司開發的基于 熒光探針的Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒

進行評測，15min即可完成檢測，低可檢測到2ng/ml的核酸酶殘留。

用量推薦

實驗類型電泳蛋白樣品制備非藥物蛋白生產藥物蛋白生產疫苗、病毒生產細胞藥物

推薦產品Benzonase(科研級)Benzonase(科研級)

Strep-tagII Benzonase(科研級)Benzonase(無內毒素級)

Strep-tagII Benzonase(無內毒素級)

細胞數量1X106個細胞(10mg組織)1g濕重 （重懸液10mL）1L 發酵上清液1L 培養物

低用量125U (0.5 µL)25U/mL(1 µL)25U/mL(1 µL)0.1U/mL(0.4 µL)0.1U/mL(0.4 µL)

推薦用量500U (2 µL)250U/mL(10 µL)250U/mL(10 µL)25U/mL(100 µL)5U/mL(20 µL)

作用時間通常作用時間37℃在15~60min；25℃在30~120min；

單位定義

37℃，pH 8.0反應條件下，在30分鐘內使△A260 值降低1.0(相當于消化37 μg DNA )的酶量定義為一個活性單位。

注意：含大量蛋白、細胞壁、其它鹽分的粗制品，對該酶活性有部分抑制作用，使用時需要增加酶的用量。

應用

蛋白提取時去除核酸污染：在重組蛋白純化或組織細胞樣品蛋白提取時，Benzonase核酸酶可有效降低樣品粘度，利于下游操作

與細胞或細菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白質產量

減少存放的外周血單細胞(PBMC)的結塊現象

降解核酸，利于不可溶性蛋白復性前高質量包涵體制備

有效去除帶負電荷的核酸對雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響，改善蛋白質的分離效果，增強2-DE分辨率

疫苗和病毒樣品制備中DNA污染的去除

儲存

置于-20°C，可保存2年。

Benzonase 核酸酶試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應用實例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果，可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。

應用實例2： 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略，在反應結束后，倒置反應管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現出醒目的綠色，陰性表現出橙色，區分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。

應用實例3：A3825-01 紅黃變色反應（肉眼觀察）

以 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起

始前，下圖為 65 度反應 30min 后。

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