TRIzol Reagent試劑

TRIzol Reagent試劑是一種可用于提取動(dòng)植物和細(xì)菌來源的組織或細(xì)胞RNA的制品。樣本在進(jìn)行勻漿的過程中，

TRIzol Reagent能夠充分破壞細(xì)胞，裂解細(xì)胞內(nèi)含物，同時(shí)可高效抑制RNA酶的活性，從而保持RNA的完整性。

TRIzol Reagent具有很強(qiáng)的廣譜性，可以適用于各種樣品的總RNA提取，提取過程方便快速，整個(gè)操作在一小時(shí)內(nèi)便可以完成

。該試劑可用于小量樣品（20-100mg組織、1x106細(xì)胞）也適用于大量樣品（≥1g組織、>107細(xì)胞）；

對(duì)人、動(dòng)物、植物組織、細(xì)菌均適用，可同時(shí)處理大量不同樣品，整個(gè)提取過程在一小時(shí)內(nèi)即可完成。

分離的總RNA無蛋白質(zhì)和DNA污染，可用于Northern Blot、Dot blot、ployA篩選、體外翻譯、RNase保護(hù)分析和基因克隆。

樣品用量及RNA產(chǎn)量

樣本類型樣本量產(chǎn)量

白細(xì)胞1x106個(gè)10~20μg

植物材料25mg10~20μg

細(xì)胞1x106個(gè)8~15μg

肌肉/腦等組織50mg10~25μg

肝臟組織50mg100~300μg

儲(chǔ)存

2-8℃避光保存，可保存2年。

TRIzol Reagent試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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