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                          當前位置:首頁  >  技術文章  >  如何讓細胞“長生不老“

                          如何讓細胞“長生不老“

                          更新時間:2024-11-20      點擊次數:715

                          細胞老化的形態和分子生物學變化

                          1、顯微鏡下觀察,老化的細胞通常會在細胞內部出現空泡(可能是凋亡小體)。但是,需要區分的是,部分細胞本身會有少量空泡,對于這些細胞,要每天觀察,注意細胞空泡是否增多。

                          2、顯微鏡下,也可能會觀察到更多的黑點,大多沿細胞周邊排布,細胞內部也可能會出現一些,但相對周邊為少。

                          3、老化以后的細胞會出現立體感慢慢消失,開始成扁平狀,這是因為細胞的折光性變差,顯微鏡下可以直觀地觀察到細胞“變薄"。

                          4、細胞與細胞之間的間隔減小或混在一起,細胞不再是梭形,而會成為各種不規則形狀。

                          5、如果是貼壁細胞,會發現細胞的貼壁性減弱,開始有細胞漂浮于培養液中。

                          6、老化的細胞,表面分泌物會增多,細胞表面的純凈度越來越低,不再保持透亮。

                          7、細胞的增殖速度顯著降低,細胞活力變弱。

                          8、有些細胞在正常培養的條件下,也會開始長角,即發生了細胞分化。

                          9、由于細胞周期中斷和DNA復制停止,老化細胞內的DNA含量與正常細胞類似,但細胞內的RNA與蛋白質豐度均比正常細胞要明顯升高。這是由于,

                          雖然細胞進入老化階段后蛋白質的整體合成速率降低,但是蛋白質的降解體系受到更加明顯的抑制,導致蛋白質在細胞內持續堆積。

                          最后,需要強調的是:由于不同組織來源的細胞,其形態本就各不相同,因此目前還沒有一個客觀的、統一的標準從細胞形態判斷并定義老化細胞。

                          因此,在細胞培養的過程中,持續觀察細胞,關注細胞的變化,是一位細胞培養員的重要工作內容。

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                           什么是細胞老化?

                          1.防止細胞老化最主要還是要做到勤觀察、勤換液、勤傳代、勤保種,特別是傳代,不能等細胞太密了之后傳,一般細胞建議長到80%~90%融合度傳代最好;

                          2.換培養液頻率與培養的細胞種類直接相關,建議新手培養員在培養每一種細胞時,多多咨詢有經驗的同學、技術員等,同時在實際操作的過程中積累經驗,形成自己的最佳培養體系;

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                          3.選擇可靠且穩定的血清和培養基至關重要:血清和培養基直接為細胞提供生長所需的營養,它們直接關系到細胞的生長狀況。務必挑選適宜的血清,否則由于營養成分不均衡,可能導致細胞提前老化。

                          此外,一個穩定的培養基同樣是培養細胞的關鍵因素。

                          4.在培養大部分貼壁細胞時,消化步驟不可避免,但是消化對細胞的表面蛋白質有一定的破壞作用,因此不能長時間進行消化并且在選擇消化酶時也要選擇較為合適的pH和濃度,不然就會使細胞老化或者分化;

                          5.在著手培養細胞并進行傳代的同時,及時進行細胞的凍存工作至關重要,以確保細胞種子庫的持續存在,這能有效預防細胞事故導致實驗室中某一株細胞絕種。盡管老化細胞不會即刻消亡,但它們的基因表達模式會經歷變化,

                          可能會對生物實驗的結果產生較大影響。如果發現正在培養的細胞老化嚴重,建議從種子庫或工作庫中重新復蘇細胞。



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