細(xì)胞培養(yǎng)中的“小黑點(diǎn)”出現(xiàn)常見(jiàn)原因

細(xì)胞培養(yǎng)中的“小黑點(diǎn)"是什么？

經(jīng)常培養(yǎng)細(xì)胞的同學(xué)們，可能都遇到過(guò)上圖的情況，突然有一天，顯微鏡下發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基里有為數(shù)不少的“小黑點(diǎn)"，它們有些知識(shí)隨著液體晃動(dòng)，有些會(huì)自主地在液體里迅速或者緩慢地游動(dòng)。

這些“小黑點(diǎn)"，也會(huì)被我們的客戶(hù)形象地稱(chēng)為“有黑色的蟲(chóng)子"。那這些“小黑桿"到底是什么呢？

出現(xiàn)“小黑點(diǎn)"最常見(jiàn)的可能

各類(lèi)細(xì)菌

細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴尽３Ｒ?jiàn)的有革蘭氏陽(yáng)性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌。其中，不乏各類(lèi)桿狀細(xì)菌，在顯微鏡下這些桿菌看起來(lái)就像“小黑點(diǎn)"一樣。

培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后，初期細(xì)胞仍能生長(zhǎng)，但隨著細(xì)菌的迅速增殖，會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁，pH改變從而導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。隨著污染的加重，細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，后變圓脫落死亡。

出現(xiàn)“小黑點(diǎn)"特殊情況

原蟲(chóng)為單細(xì)胞真核動(dòng)物，在自然界分布廣泛，種類(lèi)繁多，約有近萬(wàn)種為寄生性原蟲(chóng)，生活在動(dòng)物體內(nèi)或體表。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞受到原蟲(chóng)污染后，培養(yǎng)基輕微渾濁，鏡下可以觀(guān)察到眾多的細(xì)小點(diǎn)狀物，輕微活動(dòng)。細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮，在光鏡下觀(guān)察常可見(jiàn)到細(xì)胞核及胞漿內(nèi)

出現(xiàn)大小不等的顆粒或空泡。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，但在污染初期原蟲(chóng)的數(shù)量少，細(xì)胞還能占據(jù)優(yōu)勢(shì)，

所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，最終形成惡性循環(huán)。（對(duì)于原蟲(chóng)的定義，

業(yè)內(nèi)仍然存在一定的討論空間，也有研究者認(rèn)為原蟲(chóng)污染屬于細(xì)菌類(lèi)污染）

螨蟲(chóng)

螨蟲(chóng)屬于節(jié)肢動(dòng)物門(mén)蛛形綱廣腹亞綱的一類(lèi)體型微小的動(dòng)物，身體大小一般都在0.5毫米左右，有些小到0.1毫米，大多數(shù)種類(lèi)小于1毫米。世界上已發(fā)現(xiàn)螨蟲(chóng)（mite）有50000多種，僅次于昆蟲(chóng)。螨蟲(chóng)污染在細(xì)胞系培養(yǎng)中十分少見(jiàn)，

常見(jiàn)于原代培養(yǎng)皮膚成纖維細(xì)胞時(shí)，形態(tài)呈桿狀，能自主直線(xiàn)游動(dòng)，速度相當(dāng)快，常常源自實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的毛發(fā)中。