總超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒 (NBT 核黃素比色法) 説明

總超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒 (NBT 核黃素比色法) 

一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是含金屬輔基的酶，能催化超氧化物陰離子 發(fā)生岐化作用，生成過(guò)氧化氫(H2O2)和氧氣(O2)，是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶；由于超氧自 由基是不穩(wěn)定的的自由基，壽命極短，SOD 活性一般用間接方法測(cè)定，并利用各種呈色反應(yīng)來(lái)測(cè) 定 SOD 活力，其中顯色劑有 NBT(四氮唑藍(lán))、WST-1、WST-8 等。 雅吉生物總超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒(NBT 核黃素微板法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with NBT)是一種基于 NBT 的顯色反應(yīng)，通過(guò)比色來(lái)檢測(cè)組織、細(xì)胞、植 物、血清或其它樣品中 SOD 即超氧化物歧化酶活性的試劑盒，其檢測(cè)原理是利用 SOD 抑制 NBT 在光照下的還原作用來(lái)確定酶活性大小。在有氧化合物存在的情況下，核黃素被光還原，后經(jīng)一 系列的反應(yīng)可將 NBT 還原為藍(lán)色的甲臜(formazan)，后者在 560nm 處有強(qiáng)吸收，SOD 可清除超氧 陰離子(O2.-)，從而抑制了甲臜的形成，反應(yīng)液藍(lán)色愈深說(shuō)明超氧化物岐化酶活性愈低，反之則 酶活性愈高，據(jù)此通過(guò)比色分析就可以計(jì)算出超氧化物岐化酶活性水平。 該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

二、產(chǎn)品組成： 名稱 50T 100T Storage 試劑(A): SOD 提取液 250ml 2×250ml RT 試劑(B): NBT 顯色液 15ml 30ml -20℃ 避光 試劑(C): 酶溶液 15ml 30ml -20℃ 避光 試劑(D): 反應(yīng)啟動(dòng)液 10ml 20ml 4℃

三、自備材料： 1、生理鹽水或 PBS 2、離心機(jī)、離心管、小試管 3、分光光度計(jì)、比色杯 4、水浴鍋或恒溫箱

四、操作步驟(僅供參考)： 1、準(zhǔn)備樣品： ①血漿或含紅細(xì)胞的樣品：從待測(cè)樣品中分理出的血清或血漿不應(yīng)有溶血，如果含有應(yīng) 去除紅細(xì)胞后檢測(cè)，如超過(guò)檢測(cè)范圍，用 SOD 提取液稀釋后檢測(cè)。血清去除紅細(xì)胞的簡(jiǎn) 易方法如下：用抗凝管收集血液，顛倒混勻，取至少 500μl 全血，4℃ 3000g 離心 5min， 轉(zhuǎn)移上清至另一新的 1ml 離心管中，適量生理鹽水稀釋后待測(cè)；亦可采用紅細(xì)胞裂解液 去除紅細(xì)胞，如 ACK 紅細(xì)胞裂解液等