你真的會(huì)選ELISA Ki嗎？

說(shuō)到ELISA Kit，相信大家都不會(huì)陌生。

ELISA Kit的誕生，是為了幫助科研工作者省掉繁瑣的實(shí)驗(yàn)過(guò)程，提高科研效率。

如果選對(duì)了試劑盒，用對(duì)了實(shí)驗(yàn)技巧，就會(huì)讓您的實(shí)驗(yàn)效率事半功倍。

1.如何選購(gòu)ELISA Kit

市面上的ELISA Kit質(zhì)量良莠不齊，想要挑選到合適的試劑盒還真不是一件很容易的事情。真真假假，難以辨別。

從以下幾個(gè)方面來(lái)甄別挑選合適的ELISA Kit。

1.查找待測(cè)樣本的蛋白濃度：可以通過(guò)NCBI的文獻(xiàn)，uniprot，pax-dab上給出的蛋白表達(dá)量參考值來(lái)比較ELISA試劑盒中給出的樣本值與報(bào)道值是否一致；

2.試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測(cè)樣本的種類(lèi)：除試劑盒特別說(shuō)明外，一般不同種屬不能通用。常見(jiàn)待測(cè)樣本種類(lèi)有：血清和血漿（不同抗凝劑），細(xì)胞上清，和細(xì)胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用；

3.試劑盒的檢測(cè)范圍：也就是標(biāo)曲范圍，特別要注意待測(cè)樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi)，對(duì)于濃度很高的樣本，可以先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測(cè)定樣本。

4.試劑盒中的稀釋線性及回收率：

a.稀釋線性一般指樣本稀釋線性，是將樣本梯度稀釋下來(lái)，看各稀釋梯度濃度是否成線性；參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的最佳稀釋倍數(shù)；

b.稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的情況，加標(biāo)稀釋線性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測(cè)定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測(cè)定是否準(zhǔn)確；同樣也是確定待測(cè)樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線性和回收率的范圍在80%-120%比較合適；

5.試劑盒的其它指標(biāo)：

a.靈敏度：試劑盒能夠檢測(cè)到的樣本較低濃度的能力，如果待檢指標(biāo)含量很低，需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒；

b.板間和板內(nèi)的變異系數(shù)（CV%）:反映板內(nèi)和不同板之間是否均勻，CV%一般小于10% 比較好。

6.試劑盒的有效期：試劑盒的有效期一般是半年至一年，樣本準(zhǔn)備時(shí)間需要考慮到試劑盒的有效期。

7.試劑盒的特異性：ELISA 試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分，抗體對(duì)有關(guān)。若抗體對(duì)中之一為多抗，另一個(gè)必須為單抗，建議使用雙單抗。

8.重復(fù)性：科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性，一般 ELISA 試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 15% 以內(nèi)。

9.簡(jiǎn)便性：試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下，實(shí)驗(yàn)時(shí)間越短，操作越便利，越容易受到用戶歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個(gè)指標(biāo)。

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